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联硕新闻

细胞培育的一般进程

发布时间:2020-04-29 09:44 |  点击次数:

一、细胞准备工作 
准备工作的内容包括器皿的清洗、干燥与消毒,培育基与其他试剂的制造、分装及灭菌,无菌室或超净台的清洁与消毒,培育箱及其他仪器的检查与调试等。 

二、选材 
在无菌环境下从机体取出某种安排细胞,通过必定的处理后接入培育器血中,这一进程称为选材。理论上讲各种动物和人体内的所有安排都可以用于培育,实际上幼体安排比成年个别的安排简单培育,分解程度低的安排比分解高的简单培育,肿瘤安排比正常安排简单培育。选材后应立即处理,赶快培育,因故不能立刻培育时,可将安排块切成黄豆般大的小块,置4℃的培育液中保存。取安排时应严厉保持无菌,同时也要避免接触其他的有害物质。取病理安排和皮肤及消化道上皮细胞时简单带菌,为减少污染可用抗菌素处理。
 

三、培育 
将获得的安排细胞接入培育瓶或培育板中的进程称为培育。如系安排块培育,则直接将安排块接入培育器皿底部,几个小时后安排块可贴牢在底部,再加入培育基。如系细胞培育,一般应在接入培育器皿之前进行细胞计数,按要求以必定的量(以每毫升细胞数表明)接入培育器皿并直接加入培育基。细胞进入培育器皿后,立即放入培育箱中,使细胞尽早进入成长状态。
 

一般原代细胞培育进入培育后有一段潜伏期,在潜伏期细胞一般不割裂,但可贴壁和游走。过了潜伏期后细胞进入旺盛的割裂成长期。细胞长满瓶底后要进行传代培育,将一瓶中的细胞消化悬浮后分至两到三瓶继续培育。