上海联硕生物科技有限公司

15 年

手机商铺

商家活跃:
产品热度:

上海联硕生物科技有限公司

入驻年限:15 年

  • 联系人:

    小徐

  • 所在地区:

    上海 青浦区

  • 业务范围:

    试剂、抗体、ELISA 试剂盒、细胞库 / 细胞培养、实验室仪器 / 设备、耗材、技术服务

  • 经营模式:

    生产厂商 代理商

在线沟通

公司新闻/正文

影响ELISA试剂盒测定成果的原因和解决办法,有哪些?

人阅读 发布时间:2023-07-31 10:34

ELISA是什么?
ELISA是酶联免疫吸附测定法 (Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay , ELISA) 的简称。它是在免疫酶技术的基础上发展起来的一种新型的免疫测定技术 。
酶联免疫吸附试验的标准程序,通常是把蛋白、抗体、或激素等(即抗原)直接或是以捕捉抗体(capture Ab)固定在固相载体上,再加入一级检测抗体(primarydetection Ab),形成一个抗原抗体的复合物。如果该抗体已经用酶(enzyme)标记了,即可用来直接测定抗原的量,若无,则可利用另一个酶标记的二级抗体来测定抗原的量。测定抗原量的方法是加入该酶的底质(substrate),作用后产生出现的颜色深浅和样本中的抗原量呈正比的关系,依此原理计算出样本中的抗原总量或浓度。

ELISA试剂盒方法被广泛应用于各种抗原和抗体测定,具有灵敏度高,操作简略等优点,但是在详细实验过程中影响要素较多,而且要按照严厉的阐明要求,在临床检验中除正常反响外,有时常可见到一些错误成果(即假阳性或假阴性成果)。
影响ELISA测定错误成果的原因主要有:
标本要素;
试剂要素;
操作要素。

一、类风湿因子
人血清中IgM、IgG型类风湿因子(RF)能够与ELISA系统中的捕获抗体及酶符号二抗的FC段直接结合,然后导致假阳性。
解决办法:
1.用F(ab)2替代完好的IgG;
2.标本用联有热变性(63℃,10 min)IgG的固相吸附剂处理(将热变性IgG加入到标本稀释液中同样有用);
3.检测抗原时,能够用2-巯基yi醇等加入到标本稀释液中,使RF降解。

二、补体
ELISA系统中固相一抗和符号二抗过程中,抗体分子发作变构,其FC段的补体C1q分子结合位点被暴露出来,使C1q 能够将二者连接起来,然后形成假阳性。
解决办法:
1.用EDTA稀释标本;
2.用53℃,10 min或56℃,30 min加热血清使C1q灭活。

三、嗜异性抗体
人类血清中含有能与啮齿类动物(如鼠等)Ig(s) 结合的天然嗜异性抗体,可将ELISA系统中一抗和二抗连接起来,也能形成假阳性。
解决办法:
可在标本稀释液中加入过量的动物Ig(s),但加入量不足或亚类不同时无效。

四、嗜靶抗原的本身抗体
抗甲状腺球蛋白、抗胰岛素等嗜靶抗原的本身抗体,有时能与靶抗原结合形成复合物,在ELISA方法中均可干扰抗原抗体测定成果。
解决办法:
测定前需用理化方法将其解离后再测定。

上一篇

吐温80的用法及用量分析

下一篇

二甲基亚砜的基本用途

更多资讯

询价列表

暂时没有已询价产品

快捷询价 发送名片
    当你希望让更多商家联系你时,可以勾选后发送询价,平台会将你的询价消息推荐给更多商家。