透析袋的预处理和存储方法

为防干裂，出厂前透析袋一般都经10%的甘油处理，透析袋中含有微量的硫化物、重金属和一些具有紫外吸收的杂质，它们对蛋白质和其他生物活性物质有害，用前必须除去。新购进的普通型透析袋必须经过处理才能使用。

一、透析的原理
透析只需要使用专用的半透膜即可完成。通常是将半透膜制成袋状，将生物大分子样品溶液置入袋内，将此透析袋浸入水或缓冲液中，样品溶液中大分子量的生物分子被截留在袋内，而盐和小分子物质不断扩散透析到袋外，直到袋内外两边的浓度达到平衡为止。保留在透析袋内未透析出的样品溶液称为“保留液”，袋（膜）外的溶液称为“渗出液”或“透析液”。
透析的动力是扩散压，扩散压是由横跨膜两边的浓度梯度形成的。透析的速度反比于膜的厚度，正比于欲透析的小分子溶质在膜内外两边的浓度梯度，还正比于膜的面积和温度，通常是4℃透析，升高温度可加快透析速度。

二、透析袋的预处理
方法一：
把透析袋剪成适当长度（10-20cm）的小段。
在大体积（500ml）的2%（w/v）的碳酸氢钠和1mmol/L EDTA2Na（pH=8.0）中将透析袋煮沸10min。
用蒸馏水彻底清洗透析袋。
放在500ml的1mmol/L EDTA2Na（pH=8.0）中将之煮沸10min。
冷却后，置于30%或者50%的酒精中，放于4℃冰箱，必须确保透析袋始终浸没在溶液内。从此时其取用透析袋必须戴手套。
在使用前要用蒸馏水将透析袋里外加以清洗干净。

方法二：
可先用50%乙醇煮沸1h，再依次用50%乙醇、0.01mol/L碳酸氢钠和1mmol/L EDTA（pH=8.0）溶液洗涤，最后用蒸馏水冲洗即可使用。

方法三：
实验要求不高的可以用简易方法处理。用沸水煮5至10min，再用蒸馏水洗净，即可使用。
不过现在也有杂质含量极少，无需预处理，只需用去离子水清洗即可使用的即用型透析袋。这种透析袋具有特殊的生物技术膜，不含硫化物及金属杂质。只是比普通型透析袋稍贵。

三、三种不同类型的透析袋
普通型透析袋
1.把透析袋剪成适当长度（10-20cm）的小段；
2.在大体积的2%(W/V)碳酸氢钠和 1mmol/L EDTA(pH 8.0)中将透析袋煮沸10分钟；
3.用蒸馏水彻底清洗透析袋；
4.放在 1mmol/L EDTA(pH 8.0)中将之煮沸10分钟；
5.冷却后，存放于4度，必须确保透析袋始终浸没在溶液内。从此时起取用透析袋是必须戴手套；
6.用前在透析袋内装满水然后排出，将之清洗干净；

再生纤维素透析袋:
此类型透析袋可耐受pH范围是2.0~12.0；耐受温度是4~60℃；不能煮，也不需要煮，只需用纯水彻底冲洗即可。

纤维素透析袋:
此类型透析袋可耐受pH范围是2.0~9.0；耐受温度是4~37℃；不能煮，也不需要煮，只需用纯水彻底冲洗即可。
 

三、透析袋的选择
1.确定透析袋的分子量
在选择适合截留分子量之前，首先要明确：欲保留在透析袋中的样品和想要除去的杂质的分子量。
2.选择普通型，再生型，or纤维素透析袋
确定好分子量之后，根据实际情况，样品溶剂等，选择透析袋。
3.正确选择扁平宽度
透析袋扁平宽度的选择取决于样品体积和透析容量。较小的透析管透析更快；较大的透析管因扩散距离较长透析较慢。为易于使用，建议使用总长（包括闭合夹和顶部空间）为大约10-15cm的透析袋。
 

四、透析袋的使用
下述透析程序是一个普遍的基础透析过程。在开始透析之前应考虑到许多变数。透析样品溶剂、膜的化学相容性、膜的截留分子量，透析溶剂、透析体积、温度等变量都会影响透析速率，因此，一些应用中下述透析过程可能需要适当的变化。
1.把适量的透析液（缓冲液）加入透析装置。透析液的体积应为样品体积量的100倍。（例如：在一升透析液中透析10毫升的样品）
2.裁剪适当长度的透析管。预留一段额外长度（约占总样品体积量的20%）作为头部空间。
3.把透析管插入打开的透析夹，在约超出透析夹3-5毫米的位置再夹住，不要折叠透析袋。
4.由透析管开口端将样品装入。调整一下顶部空间的长度，夹紧透析夹。
5.把透析样品放在合适的透析缓冲液中。
6.透析要根据具体的应用需求。通常情况下，允许过夜透析。在持续透析的过程中，至少要进行3次全部更换透析液。建议在（透析后）2-4小时，6-8小时和10-14小时（第2天早晨）更换透析液。在最后一次透析液的更换后要至少继续进行2小时的透析。
 

五、透析袋的存储
1.透析袋不能在纯水中长期储存，会长菌，用0.05%die氮化钠溶液储存。
2.样品按推荐的单位长度容量加样，不可多加，样品浓度不可太大，否则容易导致膜涨破。
3.样品和透析液体积比一般是1:50~500
4.对于高浓度污染物，样品可能需要较长的时间透析，透析液需要更频繁的更换。
5.透析温度主要取决于样品。温度限制主要取决于膜的类型。纤维素透析袋可以承受的温度高达37℃，再生纤维素透析袋可以承受的温度高达60℃。

六、使用注意事项
在适当的储存情条件下，保质期为两年。干燥的透析袋要在室温或4℃储存在聚y烯袋中。一旦变湿，透析袋应浸泡在下列之一的溶液中：0.05%die氮化钠，1%苯jia酸钠或1%甲醛。（备注：一旦变潮湿，不要让透析袋干燥。不断干燥会造成孔隙结构不可恢复的倒塌）

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