上海联硕生物科技有限公司
入驻年限:15 年
- 联系人:
小徐
- 所在地区:
上海 青浦区
- 业务范围:
试剂、抗体、ELISA 试剂盒、细胞库 / 细胞培养、实验室仪器 / 设备、耗材、技术服务
- 经营模式:
生产厂商 代理商
推荐产品
公司新闻/正文
关于细胞样的保存
人阅读 发布时间:2020-06-12 13:22
一、操作步骤:
1、在37℃ 5% CO2条件下将细胞加在处理的载玻片上,用培育基培育,时间通过预试验确定;
2、细胞长好后,用洗刷液洗2分钟×3次,室温下将其放入细胞固定液中固定30-60min,蒸馏水洗刷;
3、室温下用洗刷液充沛洗刷固定细胞,(干燥后-20℃冰冻保存2周以上)
4、杂交前将固定的细胞进行如下处理;顺次在70%,90%,100%的乙醇中浸泡,脱水每次
5min,用二jia苯洗刷,除掉残留脂质顺次在100%,90%,70%乙醇中浸泡,进行再水化,每次5min,后浸泡于洗刷液中;
5、在37℃用胃蛋白酶溶液10min处理固定的细胞,以增加细胞对大分子试剂的通透性,再用洗刷液洗5min;
6、用1%甲醛固定10min,用洗刷液洗净。
二、留意:
1、所有溶液都必须用RNA酶抑制剂处理。
2、操作中重要的是及时固定,并在固定液中加入0.1%的DEPC处理,以抑制RNA酶对mRNA的分解作用。此外,过度固定对原位杂交有明显的不利影响。