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上海联硕生物科技有限公司
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上海联硕生物科技有限公司
入驻年限：17 年
- 联系人：
小徐
- 所在地区：
上海 青浦区
- 业务范围：
试剂、抗体、ELISA 试剂盒、细胞库 / 细胞培养、实验室仪器 / 设备、耗材、技术服务
- 经营模式：
生产厂商 代理商
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公司新闻/正文
关于细胞传代方法您做对了吗？
363 人阅读发布时间：2019-09-06 11:21
经过自主研发和兼并重组不断扩展企业产品线，逐步发展为试剂的专业制造商和电子商务集成供应商，成为全球试剂职业发展的者。在开始细胞传代前，仔细检查细胞传代所需的仪器和试剂是否齐全。
一：细胞与试剂方面
1、细胞(单层细胞，镜检合适)
2、培养液(MEM-0.2%LH 培养液或MEM 培养液或199 等合适细胞有要求的培养液)
3、灭活小牛血清、庆大霉素溶液（1 万单位）
4、7.5％NaHC03 溶液
5、0.25％胰蛋白酶
6、 PBS 洗液。
二：试验小用具方面
1、小方瓶(100m1)
2、克氏瓶
3、胶塞
4、吸管(10ml、1m1）
5、细胞吹打管（20 ml）(以上用具需经121℃至少15 分钟高压灭菌)
6、C02 孵箱
7、超净台
8、倒置显微镜
9、4℃、- 20℃冰箱
三：细胞传代的操作过程
1、挑选细胞：镜检细胞，挑选成长状态杰出，细胞界限清晰，具有立体感，形状好无污染、无反常及可疑病变细胞。
2、制造细胞培养液：按以下配比制造MEM-0.2%LH 培养液100ml 内，参加灭活小牛血清10m1，庆大霉素溶液0.3m1，7.5%碳酸氢钠溶液3ml。（仅供一般参考）。
3、消化细胞：先用PBS 洗液冲刷细胞外表1-2 次，每次10m1，弃去洗液，向细胞瓶内参加0.25％胰蛋白酶溶液，每瓶1m1，细胞瓶平放，使消化液彻底覆盖细胞外表。
4、至细胞彻底脱落到胰酶中：每瓶参加10m1 细胞培养液吹打涣散细胞，按所需的传代比例分装于小方瓶(100m1)中，再参加10m1 细胞培养液重复吹打一次后分装，然后补加至所需培养量。
5、加塞，置于37±1℃孵箱培养。约2～4 天成片(由细胞接种浓度决定)。
6、填写传代记录。
一：细胞与试剂方面
1、细胞(单层细胞，镜检合适)
2、培养液(MEM-0.2%LH 培养液或MEM 培养液或199 等合适细胞有要求的培养液)
3、灭活小牛血清、庆大霉素溶液（1 万单位）
4、7.5％NaHC03 溶液
5、0.25％胰蛋白酶
6、 PBS 洗液。
二：试验小用具方面
1、小方瓶(100m1)
2、克氏瓶
3、胶塞
4、吸管(10ml、1m1）
5、细胞吹打管（20 ml）(以上用具需经121℃至少15 分钟高压灭菌)
6、C02 孵箱
7、超净台
8、倒置显微镜
9、4℃、- 20℃冰箱
三：细胞传代的操作过程
1、挑选细胞：镜检细胞，挑选成长状态杰出，细胞界限清晰，具有立体感，形状好无污染、无反常及可疑病变细胞。
2、制造细胞培养液：按以下配比制造MEM-0.2%LH 培养液100ml 内，参加灭活小牛血清10m1，庆大霉素溶液0.3m1，7.5%碳酸氢钠溶液3ml。（仅供一般参考）。
3、消化细胞：先用PBS 洗液冲刷细胞外表1-2 次，每次10m1，弃去洗液，向细胞瓶内参加0.25％胰蛋白酶溶液，每瓶1m1，细胞瓶平放，使消化液彻底覆盖细胞外表。
4、至细胞彻底脱落到胰酶中：每瓶参加10m1 细胞培养液吹打涣散细胞，按所需的传代比例分装于小方瓶(100m1)中，再参加10m1 细胞培养液重复吹打一次后分装，然后补加至所需培养量。
5、加塞，置于37±1℃孵箱培养。约2～4 天成片(由细胞接种浓度决定)。
6、填写传代记录。